Вопрос: Какова подготовка к анализам ПЦР?
Сайт предоставляет справочную информацию исключительно для ознакомления. Диагностику и лечение заболеваний нужно проходить под наблюдением специалиста. У всех препаратов имеются противопоказания. Консультация специалиста обязательна!
Как подготовиться к анализу ПЦР?
Подготовка к анализам ПЦР (полимеразной цепной реакции) не требует особых усилий, однако выполнение ряда условий снизит шансы получить ложноположительные или ложноотрицательные результаты.
Для анализа ПЦР используются различные жидкости и ткани организма пациента. Это могут быть:
- кровь и её компоненты (плазма, сыворотка);
- соскобы слизистых оболочек (уретры, влагалища, матки);
- жидкости организма (спинномозговая жидкость, слюна, секреция простаты, плевральная жидкость, сперма);
- различные патологические выделения;
- моча;
- кал;
- мокрота.
Основные правила сдачи анализов для ПЦР диагностики.
- Выбор биологического материала для ПЦР анализа зависит от вида заболевания и самого возбудителя. Например, в диагностике гепатитов исследуется кровь, при поражении дыхательной системы – мокрота, слизь из носоглотки или ротоглотки, а при инфекциях мочеполовой системы – моча, соскобы слизистых, сперма.
- Анализы сдаются в период обострения болезни, когда инфекция наиболее активна. Желательно не принимать никакие лекарственные препараты, в особенности антибиотики, за 2 — 3 дня до сдачи анализов. Повторные анализы проводятся через 3 — 4 недели после завершения курса лечения.
- Взятие проб должно производиться только одноразовыми инструментами, а их хранение – в стерильных контейнерах.
Подготовка к ПЦР анализу при различных патологиях.
Подготовка ПЦР анализу крови на вирусные гепатиты
- за 1 час до анализа не курить;
- пару дней не употреблять алкоголь и жирную пищу;
- исключить высокие физические нагрузки;
- сдача анализа желательна натощак.
Подготовка к ПЦР анализу при болезнях мочеполовой системы
- за 2 — 3 дня воздержаться от половых актов;
- воздержаться от мочеиспускания за 2 — 3 часа;
- проводить гигиену половых органов простой проточной водой, без моющих средств;
- за 2 — 3 дня воздержаться от половых актов;
- воздержаться от мочеиспускания за 1,5 — 2 часа;
- проводить гигиену половых органов простой проточной водой, без моющих средств, исключить спринцевания;
- воздержаться от использования вагинальных таблеток, свечей, шариков;
- не сдавать анализы в менструальный период;
- за 4 — 5 дней исключить кольпоскопию (осмотр влагалища и влагалищную часть шейки матки), а также трансвагинальное УЗИ.
Подготовка к ПЦР мазка из носоглотки и ротоглотки (например, при инфекционном мононуклеозе, цитомегаловирусной инфекции)
Взятие гинекологического мазка с последующим исследованием его с помощью ПЦР открывает возможности для диагностики инфекций, передаваемых половых путём. Открыто данное исследование было в 80-х годах 20 века. Ученый, разработавший его, получил Нобелевское вознаграждение. Открытие позволяет узнавать возбудителя заболеваний при его минимальной концентрации в половых путях. Высокая точность инновационной ПЦР-диагностики делает её незаменимым исследованием во многих сложных клинических случаях.
Методика исследования
Суть метода полимеразной цепной реакции заключается в размножении участка ДНК. Порой для возникновения симптомов определённых заболеваний необходима мизерная концентрация бактерий или вирусов. Большинство микробиологических исследований не могут обнаружить патогенные организмы в таком разведении, а тем более их с точностью подсчитать. В таких случаях только и выручает метод активного полимеразного наращивания.
ПЦР-диагностика требует для исследования участок ДНК, который подвергается клонированию. К биологическому материалу добавляют различные реагенты, которые комплиментарно достраиваются к участкам выделенного генетического материала. Многократное преумножение ДНК позволяет определить не только род, но и вид бактериологического или вирусного материала. Уточнение вида возбудителя делает лечение максимально эффективным и этиотропным.
Мазки ПЦР в гинекологии позволяют выделить возбудителей хламидиоза, гонореи, микоплазмоза, уреаплазмоза и многих других опасных инфекций. Часто эти заболевания долго существуют в скрытых, латентных формах и долго не проявляются клиническими симптомами. ПЦР позволяет выявить их на ранних стадиях и наиболее своевременно начать лечение.
Среди явных преимуществ полимеразной реакции выделены:
- Высокая точность определения природы патогенного микроорганизма.
- Возможность выделения вируса или бактерии при мизерных их концентрациях в биологическом материале.
- Анализы проводятся достаточно быстро.
- Заражение некоторыми микроорганизмами можно выявить только с помощью ПЦР. Вирус иммунодефицита также возможно выделить иди подтвердить с помощью данного диагностического мероприятия.
Исследование в гинекологии
В гинекологической практике мазок на ПЦР используется довольно широко. Ведь он позволяет выявить возбудителей большинства воспалительных заболеваний женских половых органов наружной и внутренней локализации. Анализ проводят женщинам, активно живущим половой жизнью, беременным пациенткам и проходящим прегравидарную подготовку.
- Мазок ПЦР на ИППП нередко выявляет не только опасные бактериальные инфекции, но и заражение вирусами герпеса или папилломы человека. Последние и вовсе являются онкогенными провокаторами, излюбленным местом которых является ткань шейки матки.
- ПЦР помогает выявить хламидии у беременных женщин, которые не обследовались на данную инфекцию до зачатия. Бактерия может вызывать различные уродства и пороки развития плода, а также вовсе прекращать его развитие. Носительство хламидий может долгое время не проявляться, быть выявлено лишь во время беременности как причина внутриутробной гибели зародыша. Но и при своевременном обнаружении бактерий у женщин «в положении» предоставляется возможным провести лечение без урона для матери и плода.
Является ошибочным мнение, что взятие мазков ПЦР на ИППП при беременности создает угрозу выкидыша. Соскоб для исследования действительно берут из шейки матки, но таким образом, что не затрагивают растущий эмбрион. К тому же, данная анатомическая область по длине составляет около 4 см вне беременности и несколько уменьшается на поздних сроках гестации. Это позволяет достаточно безопасно взять материал для исследования.
Увеличивают достоверность анализа некоторые простые правила, которые следует соблюдать женщинам перед исследованием:
- Пациенткам рекомендуется не мочиться 2-3 часа до выполнения соскоба из шейки матки.
- За день до взятия материала необходимо отменить прием антибактериальных и бактериостатических средств.
- Вне беременности лучше сдавать мазок в середине менструального цикла. Неблагоприятным периодом считается время до начала менструального кровотечения или сразу после него.
- 2-3 дня не рекомендуется использовать локальные средства контрацепции или любые другие вагинальные медикаменты.
- Сутки до исследования нельзя иметь половые отношения.
- Накануне взятия пробы запрещается принимать душ и обмывать наружные половые органы.
- Нельзя брать соскоб из шейки матки в тот же день, когда проводилось кольпоскопическое исследование.
Довольно простые рекомендации позволят наиболее точно определить заболевание, передающееся половым путем, по генетическому материалу его возбудителя.
Показания для ПЦР
Полимеразная реакция как метод диагностики представляет собой новый и инновационный способ идентификации микроорганизмов. К его помощи активно прибегают в следующих случаях:
- При установлении причин бесплодия. Невозможность зачать ребенка часто связана с инфекцией половых органов, которую тяжело распознать обычными способами. Латентное течение многих инфекций определяет склонность к прерыванию беременности, несостоятельности имплантации плодного яйца.
- При установленной природе инфекционного возбудителя ПЦР проводится для выяснения фазы заболевания: острой или хронической.
- Мазки ПЦР у женщин берут в случае тяжело протекающих беременностей. Внутриутробные инфекции, приобретенные до беременности и в ее активное течение, вызывают задержку развития и гибель плода. Рождение детей с аномалиями развития заставляет обследовать мать повторно в послеродовом периоде.
- В ходе диагностической процедуры возможно установить также чувствительность и устойчивость микроорганизмов к антибиотикам.
Несмотря на кажущуюся сложность, проведение полимеразной реакции продолжатся не более 4 дней. Это время необходимо для построения полноценной молекулы ДНК, которую удается идентифицировать с конкретным микроорганизмом. Взятие биологического материала как субстрата для анализа и вовсе занимает до 5 минут.
Результат ПЦР-метода имеет два варианта интерпретации: позитивный либо негативный:
- Положительный ответ полимеразной реакции подтверждает наличие в материале микробных следов, а также указывает род и вид возбудителя.
- Отрицательный результат говорит о стерильности биологического материала, отсутствии бактерий и вирусных частиц.
На основе расшифровки мазка врач определяется с методикой лечения. Этиотропные антибиотикотерапия или противовирусное лечение позволяют быстро и бесследно очистить микрофлору от возбудителя опасных инфекций. Своевременная диагностика не позволяет навредить и растущему плоду во время беременности матери – при проведении терапевтических курсов эрадикации возбудителей инфекций, передающихся половым путем.
Мазок на заболевания урогенитальной сферы — один из самых распространенных и информативных методов анализа в современной медицине. С его помощью можно выявить не только банальные воспаления, но и предупредить развитие онкологических заболеваний. Несмотря на надежность и доступность метода, не все женщины осознают необходимость регулярного посещения гинеколога и сдачи анализов и нередко обращаются к врачу только в запущенных случаях.
Показания к назначению анализа мазка у женщин
Каждая женщина хоть раз в своей жизни, посещая гинеколога, сдавала мазок на микрофлору или скрытые инфекции. Мазок берется со стенок влагалища, цервикального канала и шейки матки. В лабораторных условиях проводится микроскопическое исследование клеток, содержащихся в биологическом материале. Такой анализ позволяет оценить состояние эпителиальных клеток матки и влагалища, выявить патогенные микроорганизмы и заболевания, передающиеся половым путем. Мазок желательно сдавать регулярно, раз в год, даже если у женщины нет видимых поводов для беспокойства, поскольку многие инфекции в течение длительного времени могут не вызывать никаких симптомов.
В обязательном порядке назначается мазок в тех случаях, когда женщина жалуется на зуд и жжение в области половых органов, необычные выделения из них, внезапную боль внизу живота. Как правило, эти признаки указывают на наличие какого-либо заболевания, диагностировать которое можно только с помощью анализа мазка. Кроме того, желательно провести исследование биоматериала в том случае, если у женщины произошел незащищенный контакт с малоизвестным ей партнером и есть риск заразиться инфекционным заболеванием, передающимся половым путем.
Также врач-гинеколог назначает обязательную сдачу анализа мазка женщинам, планирующим беременность, готовящимся к ЭКО или другим процедурам искусственного оплодотворения (ВРТ). Женщинам, ожидающим ребенка, анализ мазка проводится трижды на всем протяжении срока, поскольку инфекции способны передаваться от матери к ребенку, осложнять роды или вызывать выкидыш.
Типы анализов мазка
В гинекологии существует несколько типов анализа мазка в зависимости от вида исследования.
Появление на питательном субстрате колоний микроорганизмов говорит о наличии заболевания. Метод посева также используется для определения стратегии лечения, поскольку во время созревания колонии можно выяснить, к воздействию каких групп антибиотиков она особенно неустойчива.
- Мазок на скрытые инфекции . К скрытым инфекциям относят группу болезней, которые могут бессимптомно протекать на протяжении нескольких месяцев или даже лет, вызывая осложнения, а некоторых случаях — даже бесплодие. На сегодняшний день наиболее достоверным способом выявления скрытых инфекций является исследование мазка при помощи ПЦР (полимеразной цепной реакции). Этот метод используется для диагностики инфекций, не обнаруживаемых в общих мазках. Для проведения анализа берется секрет из шейки матки, влагалища или мочеиспускательного канала и производится многоэтапное повышение концентрации нуклеиновой кислоты и копирование отдельных фрагментов ДНК присутствующих в мазке микроорганизмов. В результате врач может установить видовую и родовую принадлежность всех патогенных бактерий и их способность вызывать развитие заболеваний. В большинстве случаев ПЦР-анализ применятся при подозрении на наличие заболеваний, передающихся половым путем и имеющих на ранних стадиях практически бессимптомное течение. Преимуществами метода являются:
- высокая точность определения возбудителя инфекции;
- возможность определения именно наличия вируса, а не продуктов его жизнедеятельности или распада;
- возможность постановки точного диагноза на основе всего одной клетки микроорганизма.
- Мазок на онкоцитологию, или тест по Папаниколау (пап-тест) , позволяет выявить наличие онкологических заболеваний в шейке матки на ранних стадиях и вовремя начать терапию. Пап-тест определяет большинство воспалительных заболеваний, дисплазию эпителия и злокачественные образования. Сдавать этот мазок рекомендуется ежегодно всем женщинам в возрасте от 21 до 65 лет. В случае если у женщины наблюдаются нарушения менструального цикла, воспалительные процессы цервикального канала, бесплодие, врач назначит мазок на онкоцитологию в обязательном порядке. Также рекомендуется пройти пап-тест при диагностировании диабета, ожирения 2–3 степени, в период планирования беременности, при приеме гормоносодержщих препаратов и наличии в организме вирусов генитального герпеса и папилломы. При анализе мазка можно получить пять типов результата в зависимости от наличия и степени патологии. Первый тип — это отрицательный показатель, говорящий о том, что никаких отклонений от нормы в организме женщины нет, и она полностью здорова. При втором типе присутствует воспалительное заболевание, требующее лечения. Третий тип свидетельствует о наличии в эпителии единичных клеток с аномальным строением ядра. Четвертый тип — подозрение на злокачественное образование или эрозию шейки матки, генитальный герпес, папиллломовирусную инфекцию, паракератоз. Пятый тип — наличие онкологического заболевания, требующего незамедлительного лечения. Следует помнить, что мазок показывает только степень изменения клеток, но не причину, их вызвавшую. Для постановки диагноза необходимы результаты других анализов, включая биопсию, кольпоскопию и гистологическое исследование. Если в мазке будут найдены атипичные клетки, то в заключении будет об этом написано, а также будет указан тип изменений. Если в расшифровке мазка на цитологию нет особых примечаний, это говорит о том, что в ходе исследования никаких патологий обнаружено не было.
Подготовка к исследованию
При выборе дня для взятия мазка нужно учитывать менструальный цикл. Желательно сдавать анализ перед началом менструации или через несколько дней после ее окончания (оптимальный срок — пятый день), чтобы избежать попадания крови в мазок. Хотя процедура взятия мазка и не слишком сложна, все же необходимо заранее принять некоторые дополнительные меры, чтобы обеспечить чистоту результата. Подготовка к мазку на инфекции у женщин заключается в следующем:
- Не использовать вагинальные свечи, тампоны, мази перед анализом.
- Отказаться от спринцевания.
- При наличии воспалительного заболевания, сопровождающегося обильным выделением секрета необходимо сначала провести лечение и только после полного выздоровления сдавать мазок.
- Воздержаться от половых контактов в течение одного-двух дней до сдачи анализа.
- Не использовать средства интимной гигиены накануне и в день процедуры.
- Воздержаться от опорожнения мочевого пузыря в ближайшее время перед сдачей мазка.
В остальном женщина может вести обычный образ жизни: не требуется ограничений ни по питанию, ни по физической активности.
Как берут мазок у женщин
Взятие у женщины мазка на флору, на скрытые инфекции и на онкоцитологию несколько различается. Во всех случаях перед процедурой женщина проходит общий гинекологический осмотр на кресле с помощью зеркала.
При мазке на флору после визуальной оценки стенок влагалища врач специальным стерильным шпателем осуществляет забор материала из трех участков — влагалища, шейки матки и наружного отверстия мочеиспускательного канала. В некоторых случаях забор производится только с двух первых участков. Взятый шпателем материал равномерно широким мазком распределяется по стерильному предметному стеклу. Нанесение материала каплей, толстым слоем или небольшим мазком считается неправильным, поскольку затрудняет работу врача-лаборанта. При этом материалы из разных участков должны наносится на стекло отдельно друг от друга. С обратной стороны стекла врач делает пометки о месте взятия мазка: U — мочеиспускательный канал, V — влагалище, С — шейка матки. После этого стекло высушивается и направляется в лабораторию на исследование.
При сдаче мазка у женщин на скрытые инфекции и на онкоцитологию забор материала производится специальной щеточкой или с помощью особых стерильных ватных тампонов. Перед взятием материала обязательно удаляют слизь, так как ее наличие может дать ложный результат. Поскольку большинство микроорганизмов являются внутриклеточными паразитами, точное обнаружение их возможно только при исследовании соскоба со стенок половых органов. При анализе на скрытые инфекции материал со щеточки помещают в физраствор, хранящийся в холодильнике. Мазок на онкоцитологию наносят на предметное стекло и высушивают.
Как правило, процедура забора мазка для женщины практически безболезненна. Неудобство может вызывать соприкосновение с гинекологическим зеркалом из-за разницы температур между телом и металлическим инструментом. При взятии материала тампоном или щеточкой с шейки матки может отмечаться незначительное болевое ощущение, которое проходит сразу после окончания манипуляции. Мазок на онкоцитологию иногда способен вызывать незначительные кровянистые выделения в течение двух-трех дней. Если возникают сильные кровотечения, повышение температуры, боли в животе, то необходимо срочно обратиться к гинекологу, поскольку такие симптомы при взятии мазка нормой не являются.
Что показывает анализ мазка у женщин: интерпретация результатов
После проведения анализа мазка пациентка получает результаты, которые полностью зависят от типа, назначенного ей исследования.
При расшифровке анализа мазка на флору необходимо знать показатели нормы:
- Плоский эпителий (пл.эп) — у здоровой женщины этот показатель не должен превышать 15 клеток в поле зрения. Большее их количество говорит о воспалительном процессе, а меньшее — о наличии гормональных нарушений.
- Лейкоциты (L) . Нормальное количество во влагалище — не более 10-ти, а в шейке матки не более 30-ти единиц.
- Палочки Дедерлейна , обеспечивающие нормальную микрофлору женских половых органов. В мазке здоровой женщины они должны присутствовать в большом количестве, поскольку их недостаток свидетельствует о нарушенной микрофлоре влагалища.
- Слизь должна присутствовать в мазке в умеренном количестве. Обильные выделения слизи — признак воспаления или инфекции.
- Грибки рода кандида, гонококки, трихомонады в мазке выявляться не должны. Их наличие свидетельствует о заболевании.
Кроме этих показателей в анализе может быть указана одна из четырех степеней чистоты влагалища. Нормальными являются только первая и вторая степень, третья и четвертая являются признаком заболевания половых путей.
Результаты анализа мазка на скрытые инфекции можно получить через 1–2 суток после сдачи. В некоторых случаях они могут быть готовы прямо в день прохождения процедуры. При помощи мазка выявляются следующие инфекции:
- герпес-вирус человека 1 и 2 типов;
- вирус Эпштейна-Барр;
- цитомегаловирус;
- герпес-вирус человека;
- вирус папилломы человека;
- бледная трепонема;
- мобилункус;
- бактероиды;
- гонококк;
- гарднерелла;
- микоплазма;
- уреаплазма;
- хламидии.
Мазок на инфекции в большинстве случаев является достаточно надежной диагностической процедурой. С его помощью можно выявить большинство серьезных заболеваний половой сферы, при этом стоимость анализа является вполне доступной даже в частных клиниках.